|
VOLTAMETRİ KURSU Tarih: 06.10.2008
Doç. Dr. Ahmet HACIMÜFTÜOĞLU Atatürk Üniversitesi Tıp Fakültesi Farmakoloji A.D.
Associate Professor Robert Stephens, PhD Ohio State University, College of Medicine, Department of Physiology and Cell Biology,US
Voltametri Hakkında Bilgi: Voltametri (bilgisayarlı sensor teknolojisi) sistemi denekte beyin kesitleri ve tek hücrelerde nörotransmitter salınımı ve hareketleri konusunda bir yöntem sağlamaktadır. 5-30 mikrometre çevresi olan karbon veya seramikten yapılmış olan mikroelektrotların kullanımı, monoaminlerin, asetilkolinin, nitrikoksidin, glutamatın hareketleri hakkında bilgi sahibi olmamızı sağlar. Voltametrik metodlar nörokimyasalların hızlı (1-200 Hz) bir şekilde ölçümünü sağlar. Eskiden bu sistemlerde bulunan özgünlük problemi geliştirilen enzim kaplama ve seçici geçirgen bariyer kullanma (nafion, mPD gibi) sayesinde aşılmıştır. Voltametrik metodun dayandığı temel elektrokimyasal reaksiyonlarda; sabit veya değişmeli voltaj uygulanarak analize edilmek istenen madde oksidasyona uğratılır ve elektronlar oluşur. Bilgisayarda oluşan değerler, verilen glutamat veya diğer maddelerin miktarıyla birebir orantılıdır. Nöronal fonksiyonlara katkısı olan endojen elektrokimyasal aktif maddeler, elektrotların nafion veya mPD gibi kaplayıcılarla kaplanması sonucu elektrotların selektivitesini büyük oranda artırmıştır ve bu sayede askorbat, ürik asit gibi ekstraselüler alanda bulunan karışıklığa yol açması muhtemel maddelerin (interferent) etkisi elimine edilmiştir. Glutamat voltametri elektrodu buna bir örnektir. Bu platin elektrot önce nafionla kaplanır. Nafion teflondan elde edilir ve sulfonik asit grupları vardır. Sulfonat grupları negatif yüklüdür ve interferentlerin geri itilmesini sağlar. Bu şekilde merkezi sinir sisteminde askorbik asit ve dopac, diğer interferentler gibi elenenler arasında kalır. Glutamat oksidaz ve 0.7 volt voltaj uygulaması, glutamatın hidrojen perokside ve elektron akımına dönüşümünü sağlar. Oluşan akım glutamat miktarıyla birebir orantılıdır.
Kurs Programı: 06.10. 2008 Pazartesi 08:30–09:00 AÇILIŞ VE KAYIT 09:00–10:00 Biyolojik Sistemlerde hızlı elektrokimyasal kayıtlarla ilgili genel bilgiler 10:00–10:15 Ara 10:15–12:30 Prob yapım teknikleri, elektrot kaplama, referans elektrotlar, elektrot kalibrasyonları 12:00–13:30 Öğle Arası 13:30–15:00 İn vivo kayıt alma (L-glutamat salınım ve geri alınımın değerlendirmesi) 15:15-17:00 İn vivo kayıt alma (L-glutamat salınım ve geri alınımın değerlendirmesi) |